T-SPOT.TB 在艾滋病并肺結核診斷中的價(jià)值分析

  肺結核為艾滋病常見(jiàn)、多發(fā)性感染疾病，超過(guò)30% 的艾滋病患者死于肺結核 [1]。當前，結核感染臨床診斷的金標準是結核菌培養，但該方法用時(shí)較長(cháng)，且檢測陽(yáng)性率較低，無(wú)法及時(shí)準確的對患者進(jìn)行診斷[2]。Ｔ細胞斑點(diǎn)試驗 (T-SPOT.TB) 是一種用于結核感染檢測的新技術(shù)，其原理是檢測機體是否存在分泌IFN-γ 的 Mtb 抗原特異性Ｔ淋巴細胞，進(jìn)而判斷機體是否感染結核疾病 [3]。我院自 2011 年 1 月開(kāi)始使用T-SPOT.TB 對艾滋病患者是否感染肺結核進(jìn)行診斷，效果滿(mǎn)意?，F報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料  收集 2011年1月至2014年6月間我院收治的53例艾滋病并肺結核患者作為觀(guān)察組，46 例艾滋病無(wú)肺結核患者作為對照組?；颊呔?jīng)艾滋病初篩和確診試驗確診。觀(guān)察組肺結核的診斷則依據《肺結核診斷和治療指南》，且參照患者癥狀、影像學(xué)、細菌學(xué)結果。觀(guān)察組 53 例：男 29 例，女 24 例；年齡26~72 歲，平均(46.1±13.4) 歲。對照組46 例：男 28 例，女 18 例；年齡 28~70 歲，平均 (45.2±14.7) 歲。

1.2 方法  患者取 5ml 外周靜脈血，加入肝素抗凝，分離外周血單個(gè)核細胞 (PBMC)。加入 AIM-V 培養液，調整細胞濃度至 2.5×106/ml。取已包被抗 IFN-γ 抗體微量板，加入 50μl AIM-V 至陰性對照孔，加入50μl 植物血凝素 (PHA) 至 PHA 對照孔，加入 50μl結核分枝桿菌特異抗原 A(ESAT-6) 至 A 檢測孔，加入 50μl 抗原 B(CFP-10) 至 B 檢測孔。各孔分別加入100μl 2.5×105/ml 的 PBMC 溶液，置于 5%CO2 培養箱中，37℃下培養 20h。用 PBS 洗脫，各孔分別加入50μl 標記過(guò)的 IFN-γ 抗體，4℃下孵育 1h，PBS 洗脫，加入 50μl 底物進(jìn)行顯色，室溫下孵育 7min，純水洗滌終止反應。對各孔顏色斑點(diǎn)數進(jìn)行計數。判斷標準：①當陰性對照孔的點(diǎn)數＜ 6 時(shí)，( 檢測孔點(diǎn)數 -陰性對照孔點(diǎn)數 ) ≥６為陽(yáng)性；②當陰性對照孔的點(diǎn)數≥６時(shí)，檢測孔點(diǎn)數 > 陰性對照孔的 2 倍為陽(yáng)性。

1.3 統計學(xué)方法 以 SPSS19.0 進(jìn)行統計學(xué)處理。計數資料以 χ2 檢驗。P<0.05 差異有統計學(xué)意義。

2 結果

2.1兩組陽(yáng)性率比較  觀(guān)察組 T-SPOT.TB 試驗陽(yáng)性率為 81.1%(43/53)，對照組 T-SPOT.TB 試驗陽(yáng)性率為 15.2%(7/46)。兩組比較差異有統計學(xué)意義(χ2=42.802，P=0.000)。

2.2T-SPOT.TB 診斷艾滋病并肺結核的價(jià)值 對 T-SPOT.TB 診斷艾滋病并肺結核的價(jià)值進(jìn)行了分析：靈敏度為 86.0%，特異度為 79.6%，陽(yáng)性預測值為81.1%，陰性預測值為 84.8%。

2.3CD4+ 計 數 對 T-SPOT.TB 陽(yáng) 性 率 的 影 響將觀(guān)察組患者依據 CD4+ 水平分為兩組。CD4+ 計數

≥ 200/μl 患 者 18 例，T-SPOT.TB 試 驗 陽(yáng) 性 率 為83.3%(15/18) ；CD4+ 計數 <200/μl 患者 35 例，T-SPOT.TB 試驗陽(yáng)性率為 74.3%(26/35)。兩組比較差異無(wú)統計學(xué)意義 (χ2=0.577，P=0.448)。

3 討論

肺結核臨床為艾滋病患者常見(jiàn)的機會(huì )感染疾病，同時(shí)也是艾滋病患者死亡的原因。因此，對肺結核進(jìn)行及時(shí)、準確的診斷，并制定有效的治療及抗逆轉錄病毒方案，對患者預后非常重要。但肺結核患者臨床缺乏典型影像學(xué)表現，痰細菌檢測的陽(yáng)性率低，臨床檢測常出現漏診和誤診 [4]。因此，有效的檢測方法一直受廣大醫師的關(guān)注。T-SPOT.TB 試驗是由酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)發(fā)展起來(lái)的結核感染檢測新技術(shù)，檢測原理為：患者發(fā)生結核感染后，分泌產(chǎn)生記憶性的 T 淋巴細胞，給予結核相關(guān)抗原的刺激，記憶性 T 淋巴細胞可快速轉增殖為效應性的Ｔ淋巴細胞，并會(huì )分泌出IFN-γ，因此對 IFN-γ 的數目進(jìn)行檢測，就可以判定機體是否發(fā)生結核感染 [5]。國內外研究顯示，普通人群 T-SPOT.TB 試驗對結核感染診斷的準確率超過(guò)了 90%[6-8]。童學(xué)成等 [9] 的研究中，使用 T-SPOT.TB 試驗對 45 例并發(fā)肺結核艾滋病患者進(jìn)行了診斷，其診斷準確率達到了 80%，顯著(zhù)性高于未合并肺結核患者的 13.3%。陳仁芳等 [10] 使用 T-SPOT.TB 試驗對 26例并活動(dòng)性肺結核艾滋病患者進(jìn)行了診斷，其準確率達到了 92.3%，顯著(zhù)高于未合并活動(dòng)性肺結核患者的16.7%。這些結果提示了，T-SPOT.TB 試驗可對艾滋病患者是否感染結核進(jìn)行診斷。

本研究對合并肺結核和未合并肺結核的艾滋病患者進(jìn)行了 T-SPOT.TB 試驗，結果顯示：觀(guān)察組陽(yáng)性率為81.1%(43/53) 顯著(zhù)高于對照組的 15.2%(7/46)。本組進(jìn)一步研究了 T-SPOT.TB 對艾滋病并肺結核的診斷價(jià)值，結果顯示：T-SPOT.TB 的靈敏度為 86.0%，特異度為 79.6%，陽(yáng)性預測值為 81.1%，陰性預測值為84.8%。本組研究結果提示，T-SPOT.TB 可有效對艾滋病并肺結核進(jìn)行診斷，具有較高的靈敏度和特異度。

在進(jìn)一步研究中，我們探討了機體免疫狀態(tài)診斷結果的影響，發(fā)現：CD4+ 計數≥ 200/μl 患者診斷陽(yáng)性率為83.3%(15/18) 與 CD4+ 計數 <200/μl 患者診斷陽(yáng)性率74.3%(26/35) 比較，無(wú)明顯差異。提示了機體免疫狀態(tài)對檢測結果影響不大。綜上所述，T-SPOT.TB 試驗可對艾滋病并肺結核進(jìn)行有效診斷，具有較高的敏感度和特異度。

參考文獻：

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[9]童學(xué)成 , 陳國春 , 濮翔科 , 等 . 結核感染Ｔ細胞斑點(diǎn)試驗對艾滋病合并肺結核的臨床診斷價(jià)值 [J]. 中華醫院感染學(xué)雜志 ,2014,24(14): 3632-3634.

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